検出方法については、患者検体からのEV71遺伝子検出と、培養細胞によるウイルス分離を併用した。患者検体からのEV71遺伝子検出については、谷脇らの方法1) によるエンテロウイルスの5’UTR領域に対するPCRを行い、陽性となったものについて、山崎らの方法2) で、EV71のVP4-2領域に対するPCRにより同定した。ウイルス分離では、Vero、LLC-MK2、FL、RD-18Sの4種類の細胞を用い、エンテロウイルスに特徴的なCPEを形成したものについて、愛媛県作製の抗EV71血清で中和試験を行った。これらのうち、手足口病患者検体3件、無菌性髄膜炎患者検体1件については、Nixらの方法3) によるVP1領域のsemi/nested PCRを行った後ダイレクトシークエンスにより塩基配列を解読し、301bpについて系統樹解析を行った。
EV71は3月1件、4月1件、5月30件、6月37件、7月18件、8月（22日現在）5件、計92件から検出された。陽性例の臨床診断名は手足口病79件、ヘルパンギーナ3件、無菌性髄膜炎3件等であった（表１）。手足口病患者検体からは、84.0％（搬入検体94件中79件）でEV71が検出されており、本県の手足口病の原因ウイルスは大部分がEV71であったことが示された。また、無菌性髄膜炎検体は13件搬入されたが、ウイルスを検出できたものは4件あり、うち3件をEV71が占めた。
EV71の遺伝子の系統樹解析の結果では、遺伝子型は4検体ともにC2型に分類され、これらの相同性は99.7〜100％であった（図1）。
感染症発生動向調査において、2010年の高知県の定点当たりの手足口病患者は第17週で上昇し始め、第28週で13.33人とピークを迎えた。現在（第33週）では下降しているものの、医療圏によっては本県の注意報基準値（2.00人）を超過しているところもあり、いまだ注意を必要としている。
文 献
１）谷脇 妙, 他, 高知衛研 54, 29-34, 2008
２）山崎謙治, 他, 感染症学雑誌 75, 909-915, 2006
３）Nix WA, et al ., J Clin Microbiol 44: 2698-2704, 2006
高知県衛生研究所 細見卓司 鍋島 民 下司 勲 松本道明 今井 淳
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