牧場牛舎における腸管出血性大腸菌Ｏ157:H7感染例について−富山県

1997年６月20〜22日､富山県内小杉町に住む２歳の女児(Ａ)と入善町に住む２歳の男児(Ｂ)が下痢､腹痛､血便などで医療機関を受診した。検査により､大腸菌Ｏ157が検出された旨の届出があった。両患者は６月15日11〜15時､一部観光に開放されているＮ牧場を別々に家族と訪れ､レストハウスで食事をしたり､同牧場にある４棟の牛舎のうち､牛舎１(１〜８カ月齢の子牛育成舎)に入り､子牛や鉄柵に触れたことが判明した。他に患者ＡとＢに共通の接点はなかった。また､患者Ｂには指しゃぶり癖があった。６月８〜30日の間､Ｎ牧場レストハウス利用者(1,200名以上)はもちろん､この時期富山県で他に大腸菌Ｏ157感染者の届出はなかった。

保健所では患者接触者とレストハウス従業員計151名の糞便､レストハウスの食材(肉､アイスクリーム等)､飲料水計13件､レストハウスや牛舎１のふきとり84件について､家畜保健衛生所では牛舎１〜４に収容されていた牛 240頭(うち子牛80頭)の糞便について菌検索を行った。その結果､大腸菌Ｏ157は牛舎１の床ふきとり(Ｃ)､同牛舎の子牛55頭中の１頭(Ｄ)､患者が立ち入ってない牛舎２〜４の牛185頭中の子牛１頭(Ｅ)から分離されたが､その他からは分離されなかった。分離菌５株(Ａ〜Ｅ)はすべてVero毒素VT１､VT２およびeaeA遺伝子を有し､生物型３､ファージ型１であった。また､全株とも約３と65Mdのプラスミドを保持しプラスミドプロファイルは同じであった。プライマーAP45を用いたRAPD PCRでも､同じサイズのDNA増幅像が認められた。薬剤感受性を調べると､５株すべてが61種の薬剤に感受性､25種の薬剤に耐性であった。Ａ〜Ｅ株は昨年全国で分離された代表的な５菌株にくらべてさらに13剤(ペニシリン系７剤､テトラサイクリン系３剤､その他３剤)に対する耐性を獲得していた。パルスフィールド電気泳動像(PFGE)はXbaI使用の場合､菌株Ｂ､Ｃ､Ｄ､Ｅは同じか､極めて類似のパターンで､ＡとＢ〜Ｅは基本的に似ているが､Ａではマイナーのバンドである約390kbのバンドがなく､330kbのバンドがある点でＢ〜Ｅと異なっていた(図１)。SpeI使用の場合にも､菌株Ｂ〜Ｄは同じか極めて類似のパターンで､ＡはＢ〜Ｅとは少しだけ異なっていた。患者Ａの菌分離平板は既になかったので､他のコロニーを調べることは出来なかった。そこで分離後14〜18日室温放置された菌株ＤとＥについて再分離し､それぞれ44､43個のコロニーを釣菌し､XbaI処理後､再度PFGEを実施した。その結果､菌株Ｄは７コロニー(16％)､菌株Ｅでは１コロニー(２％)にパターンの変化がみられた。菌株ＡとＢ〜Ｅの差は約390kbのDNA 断片でみられるが､菌株Ｄ､Ｅとその変異株の差も変異８コロニー中５コロニーにおいて同じ約390kbのDNA断片で認められた。ハイブリダイゼーションでは､VT２遺伝子はこのDNA 断片に認められず､約500kbのDNA 断片に認められた。このような結果は菌株Ｄが腸管内で菌株Ａに変異することがあることを示唆する。

Ｎ牧場では､感染予防のため､乳酸菌投与による保菌牛の除菌処置､手洗い施設と踏み込み消毒槽の充実､来場者に対する注意事項の掲示､職員に対する衛生教育の徹底並びに生産､ふれあい､飲食の各ゾーンの分離等の対策を実施した。

この事例では､患者ＡとＢは同じ時間帯に同じ牛舎に入った疫学的事実､菌株Ａ､Ｂ､Ｃ､Ｄは変異しやすい性質から生じたと思われるわずかなPFGE像の差を除き多くの分析法で一致した事実より､患者ＡとＢは牛舎１で建物あるいは子牛に触れて原因菌を手に付着させ､指しゃぶり癖等により口に運び感染したと推定される。

富山県衛生研究所
刑部陽宅　平田清久　田中大祐　北村　敬
黒部保健所　園家敏雄　島田賢三　飯田恭子
小杉保健所　布野純子　木屋　昭　加藤一之

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